Experimentele evaluatie van toxiciteit

Dit artikel analyseert de manier waarop het toxische effect wordt gekwantificeerd.

De evaluatie van de toxiciteit van xenobiotica kan worden bepaald met een reeks analyses op acute, subacute, subchronische en chronische toxiciteit. Alvorens naar de toxicologische test te gaan, is het erg belangrijk om de giftige stof vanuit chemisch oogpunt te identificeren. Er worden analytische chemische tests uitgevoerd, waarna moet worden bepaald of het molecuul chirale centra en mogelijke isomeren heeft.

Verder worden de zuiverheid van het molecuul, de oplosbaarheid, de stabiliteit, de dampdruk, de olie/water verdelingscoëfficiënt, het ionisatiepotentieel, de chemische reactiviteit en de pH-stabiliteit bepaald. Als we tot slot naar farmaceutische of cosmetische producten kijken, analyseren we ook de formulering.

Aan het einde van de chemische identificatie is het mogelijk om over te gaan tot identificatie van het product dankzij het gebruik van databases van reeds bekende producten, waardoor het zoekveld wordt verkleind.
Er zijn zeer strikte wettelijke bepalingen met betrekking tot de handel, het transport, de productie en het vrijkomen in de atmosfeer van verschillende categorieën giftige producten. Als giftige producten niet aan deze voorschriften voldoen, mogen ze niet op de markt worden gebracht en dus worden gebruikt.
Het laatste punt van de toxicologische tests, alvorens te komen tot een "analyse op de mens", is de analyse van de mogelijke effecten op het dier.

De keuze, hoeveelheid, toepassing van toxicologische tests, gebruik en verzorging van proefdieren zijn geregeld in specifieke regelgeving. De dieren die het meest worden gebruikt voor toxicologische tests zijn ratten, muizen, konijnen, hamsters, honden, katten, varkens en primaten. Natuurlijk beginnen we met gemakkelijk hanteerbare en kleine dieren, om vervolgens - afhankelijk van de resultaten - over te gaan tot grotere soorten vergelijkbaar met de mens.
Deze proefdieren moeten onder gecontroleerde omstandigheden groeien, dus in leefruimten met een normale licht-donkercyclus, om het circadiane en hormonale ritme, een bepaalde vochtigheidsgraad en een bepaalde omgevingstemperatuur te behouden, ze kunnen in neonatale, adolescente Deze dieren moeten GEZOND zijn en mogen geen drager zijn van infecties, aangezien het besmette dier gezonde dieren kan besmetten, waardoor onderzoeksanalyses in gevaar komen.

Alvorens onderzoek op het dier uit te voeren, is het noodzakelijk om een bepaalde periode te laten verstrijken om alle fysiologische omstandigheden te stabiliseren en het te laten wennen aan de nieuwe omgeving.Als het dier zich heeft aangepast, beginnen de toxicologische tests. De stoffen die worden getest, moeten aan het dier worden toegediend op de manier die het meest lijkt op toediening bij de mens, dus oraal, geïnhaleerd, subcutaan of intraveneus. De orale toediening aan het dier bestaat uit het oplossen van de stof in water of voedsel. Deze methode is zeer bruikbaar bij chronische besmetting, die zeer dicht bij besmetting bij de mens ligt door de inname van kleine concentraties toxische stoffen in voedsel. Deze wijze van toediening heeft echter een klein nadeel, aangezien we er moeilijk in slagen om precies te weten de hoeveelheid die het dier gedurende de dag heeft ingenomen. Om een exacte berekening te krijgen van de aan het dier toe te dienen dosering, moeten maagsondes worden gebruikt (toediening via sondevoeding).
De dermale toediening bestaat uit het verspreiden van de stof op de geschoren nek van het dier.Waarom de nek?Deze toedieningsplaats wordt gebruikt zodat het dier niet zelf gaat likken of krabben, waardoor de aangebrachte stof wordt verwijderd.
De inhalatieroute is een zeer dure en moeilijke toedieningswijze. Er zijn een aantal soorten "hyperbare kamers" waar het dier wordt gedwongen om het gas in te ademen dat in de kamer wordt gebracht.

Wat wordt er na toediening van de giftige stof in het dier geanalyseerd?

Haaranalyse (alopecia of hirsutisme);
Karakteranalyse;
Huidanalyse;
Ooganalyse (pupil, tranenvloed, hoornvlies, iris);
Ganganalyse (analyse van de beweging van het dier);
Analyse van motorische activiteiten;
Analyse van herhaalde stereotiepe bewegingen (continu kauwen, apathie, continu krabben, oren aanraken, trillen);
Analyse van zintuiglijke functies (lichtflitsen, geluiden; aanraking);
Analyse van het autonome zenuwstelsel (temperatuur, afscheiding, ontlasting, urine, ademhaling);
CNS-analyse (dierlijk gedrag);
Analyse van bloedcomponenten (hematocriet, leukocyten, hemoglobine);
Waterbalansanalyse (nierfunctie, leverfunctie, glycemie, urine);
autopsie onderzoek;
Histologisch onderzoek.

Al deze dierproeven die in de verschillende laboratoria worden uitgevoerd - gestandaardiseerd en internationaal erkend - zijn vastgesteld door de OESO (Organisatie voor Economische Samenwerking en Ontwikkeling) Er wordt rekening gehouden met verschillende punten zoals het aantal dieren, het aantal te doseren getest, het verloop van de zoekopdracht, de groepering van alle gegevens van elke afzonderlijke zoekopdracht en tenslotte de interpretatie van de gegevens (het is belangrijk om de gegevens te reproduceren).

Het behalen van excellente onderzoeksresultaten hangt af van wie de analyses uitvoert en ook van de gebruikte instrumentatie.Er is een catalogus van regels, bekend als regels van goede laboratoriumpraktijken of zelfs met het acroniem GLP, die moeten worden gerespecteerd zodat de resultaten zijn betrouwbaar en internationaal erkend Als het laboratorium niet over de GLP beschikt, kunnen de verkregen resultaten ook niet worden geaccepteerd, omdat het de regels van het handboek niet respecteert.